HEMATOLOGIA

HEMATOLOGIA

EsfregaçosMétodo das lâminas

• Colocar a gota de sangue a cerca de 1 cm do bordo da lâmina

• A gota não deve ter mais de 2mm de ∅

• A lâmina de deslizamento deve ser mais estreita do que a que tem o sangue e de bordo esmerilado

• O ângulo entre as 2 lâminas deve variar entre 30 e 40º

HEMATOLOGIA• Método das lâminas

HEMATOLOGIA

Esfregaços

A espessura do esfregaço varia em função de:

• Ângulo das lâminas

• Pressão

• Rapidez da extensão

• Tamanho da gota

HEMATOLOGIA

Esfregaços de boa qualidade

• Fino e regular

• Bordos quase rectilíneos, distantes do bordo da lâmina

• Terminando de forma arredondada

HEMATOLOGIA

• Esfregaços de má qualidade

HEMATOLOGIA

Esfregaço de má qualidade

HEMATOLOGIAColoração de má qualidade

HEMATOLOGIA

Células endoteliais Células epiteliais

Células adiposas

HEMATOLOGIA

Observação do esfregaço

Com objectiva de 40x:• Avaliar a qualidade da preparação

• Distribuição celular

• Presença de aglutinação

• Presença de rouleaux

• Seleccionar uma área de observação

Com objectiva de 100x:

• Pesquisar células anormais

• Existência de grânulos citoplasmáticos

HEMATOLOGIA

Esfregaço ( 40x )

HEMATOLOGIA

Esfregaço ( 100x )

HEMATOLOGIA

Rouleaux ( 40x ) Rouleaux ( 100x )

HEMATOLOGIA

Rouleaux

Surge quando há aumento da concentração plasmática deproteínas de alto PM:

• Gravidez - ↑Fibrinogénio

• Condições inflamatórias - ↑Imunoglobulinas (policlonal)↑α2-macroglobulina↑Fibrinogénio

• Discrasias dos plasmócitos – ↑Paraproteína monoclonal(MM, MW)

HEMATOLOGIA

Autoaglutinação (40x) Autoaglutinação (100x)

HEMATOLOGIA

Esfregaços

Por alterações da técnica do esfregaço podemsurgir:

• Equinocitos

• Estomatocitos

• Codocitos

• Dacriocitos

HEMATOLOGIAEquinocitos

HEMATOLOGIA

Estomatocitos

HEMATOLOGIA

Codocitos

HEMATOLOGIA

Dacriocitos

HEMATOLOGIAEsfregaços

Um esfregaço de adulto normal pode apresentar:

• Formas ovais que não excedam 10%

• Esquizocitos até 0,1%

• Baixa percentagem de formas retraídas

HEMATOLOGIA

Formas ovais

HEMATOLOGIA

Esquizocitos

HEMATOLOGIA

Alterações na coloração dos eritrócitos

• Hipocromasia (Hipocromia)

• Hipercromasia (Hipercromia)

• Anisocromasia (Anisocromia)

• Policromasia (Policromatofilia)

HEMATOLOGIAAlterações na coloraçãoHipocromia

Os eritrócitos coram de uma forma pálida

Pode ser devida a:

• Diminuição da concentração em hemoglobina– Deficiência na síntese do heme– Deficiência na síntese da globina– Existência de estados inflamatórios e infecções crónicas

• Diminuição da espessura do eritrócito

HEMATOLOGIA

Hipocromasia

HEMATOLOGIA

Alterações na coloraçãoHipercromia

Os eritrócitos coram de uma forma mais intensaPode ser devida a: • Um aumento da espessura do eritrócito, emboraa sua concentração em hemoglobina seja normal

– Sangue do RN– Anemia megaloblástica

• Um aumento simultâneo da espessura e da CMHG – Esferocitose

HEMATOLOGIA

Hipercromasia

HEMATOLOGIA

Alterações na coloraçãoAnisocromia

Os eritrócitos apresentam colorações diferentes

Encontra-se em:

• Doentes com anemia ferropénica que estejam a res-ponder à terapêutica

• Após transfusão com sangue normal a doentes com anemia hipocrómica

• Anemia sideroblástica

HEMATOLOGIA

Anisocromasia

HEMATOLOGIA

Policromasia

HEMATOLOGIA

MicrocitosEritrócitos de volume < 80 µ3

HEMATOLOGIA

MacrocitosEritrócitos de volume > 96 µ3

HEMATOLOGIA

Anisocitose

Historicamente o termo anisocitose indica que oseritrócitos, observados em esfregaço, apresentamdiâmetros muito diferentes

HEMATOLOGIA

Anisocitose

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseO termo indica que nos esfregaços se encon-

tram eritrócitos de formas muito variáveis: arredondadas, ovais, em pêra, em raquete, crenados, etc.

Desde que estas formas não sejam devidas a alteração dos eritrócitos durante a efectuação do esfregaço a sua existência tem vindo a ser explicada por recentes descobertas da estru-tura e das alterações bioquímica da membra-na ou do interior do eritrócito

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseNomenclatura

Codocito sinoEliptocito elípticoOvalocito ovalQuenizocito covinhaEstomatocito boca

Acantocito espícula Queratocito corno Dacriocito lágrima Drepanocito foiceEsquizocito corte

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Codocito• Eritrócito em forma de sino• Classificam-se em tipo l e ll consoante a importância da

sua cavidade• Em esfregaço:

Os de tipo l ⇒ células em alvo Os de tipo ll ⇒ aspecto em elmo

• Doenças:Hemoglobinopatias (Talassémia)Anemias ferropénicasObstrução biliarDeficiência hereditária em LCAT

LCAT = Lecitina colesterol aciltransferase

HEMATOLOGIA

Codocito Células em alvo DianócitosTarget-cells

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseEliptocito • Eritrócito de forma elíptica• Classificam-se em tipo:

l - células ligeiramente ovaisll - “ nitidamente ovaislll - “ elípticaslV - “ baciliformes

• Mecanismos de formação:

A maior parte das mutações eliptocitogénicas afectam a estrutura da membrana do GV a nível de:

• 80% gene da α espectrina• 15% gene da proteína 4.1• 5% gene da β espectrina

HEMATOLOGIA

Eliptocitose

HEMATOLOGIA

Eliptocitose

HEMATOLOGIA

Eliptocito

• Doenças:

– Qualquer anemia grave pode apresentar 15% destas formas

– A eliptocitose hereditária apresenta grande % de eliptocitos, geralmente do tipo lll

• Clinicamente pode haver:

- Eliptocitose sem expressão da patologia- Eliptocitose com hemólise compensada por uma hiperfunção medular- Anemia hemolítica eliptocitária

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseOvalocito

CITOLOGIA HEMATOLÓGICA

Poiquilocitose Estomatocito• Eritrócito que apresenta uma palidez central oval,

triangular ou em fenda mais ou menos estreita• Características físicas:

Fragilidade osmótica aumentadaAuto-hemólise elevada

• Mecanismos de formação:in vivo – ainda por estudarin vitro – derivados catiónicos de drogas

( fenotiazida, clorpromazina )pH baixo

HEMATOLOGIA

Estomatocitose

HEMATOLOGIA

Estomatocito

• Doenças:

Estomatocitose hereditáriaAlcoolismo agudoCirrose alcoólicaDeficiência em glutatiãoIntoxicação por PbMononucleose infecciosaTalassémia minor

Doenças malignas

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseQuenizocito

• Eritrócito que tem mais de duas cavidades• É geralmente triconcavo• Forma estável• Difícil de observar no esfregaço• Mecanismo de formação:

Desconhecido• Doenças:

Encontram-se em todas as situações em que se observam os esferocitos

HEMATOLOGIA

Quenizocito

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Esferocito

• Eritrócito que tem uma espessura maior do que o normal

• Concentração em Hb maior do que o discocito normal

• Mecanismo de formação:

A maior parte das mutações esferocitogénicas afectam a estrutura da membrana do GV a nível de:

• 50% gene da ankyrin• 30% gene da β espectrina• 20% gene da banda 3

HEMATOLOGIA

Esferocitose

HEMATOLOGIAEsferocitose

HEMATOLOGIA

Esferocito

• Doenças:

Esferocitose hereditáriaTodas as restantes anemias hemolíticas

Nota:Se à doença se associar uma icterícia obstrutiva, isso leva ao aumento dos lípidos da membrana do GV e o aumento da superfície que disso resulta normaliza os esferocitos, quer seja no aspecto morfológico quer seja no das características físicas

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Leptocito

• Eritrócito que tem uma espessura menor do que o normal

• Em coloração mostra-se muito pálido com uma zona central quase incolor

• Mecanismos de formação:– Diminuição do teor de Hb celular– Diminuição do teor em água celular– Aumento da superfície da membrana– Conjugação de 2 mecanismos

HEMATOLOGIA

Leptocito

HEMATOLOGIA

Leptocito

Doenças:• Micro-leptocitos

– Anemias ferropénicas– Anemias hipocrómicas hipersiderémicas– Talassémias e outras hemoglobinopatias

• Leptocitos– Obstrução biliar– Algumas cirroses e esteatorreias

• Macro-leptocitos– Talassémias– Diseritropoieses

HEMATOLOGIA Poiquilocitose Equinocito

• Eritrócito que tem de 10 a 30 espículas regulares

Pode surgir:

• Como artefacto devido ao “efeito de vidro” , dado que estedifunde material alcalino que tem efeito equinogénico

• Em sangue conservado a 4ºC durante 3 semanas ou a37ºC durante 24 h

(É um fenómeno reversível que parece ser devido a ↓ ATP intracelular e aoaparecimento de liso-lecitina no plasma)

• Em doentes que tenham recebido plasma de sangueconservado nas condições anteriores

(O efeito equinogénico do plasma neutraliza-se pelo seu aquecimento a56ºC durante 30 min, o que destruirá a LCAT que produz a liso-lecitina)

HEMATOLOGIA

Equinocito

HEMATOLOGIA

Equinocito• Para que, in vivo, se possa afirmar a existência deequinocitos é necessário que a observação do sangue se faça a fresco, entre duas superfícies de material plástico

• Agentes equinogénicos:- in vivo

ácidos gordosliso-lecitinadepleção de ATP

- in vitroderivados aniónicos de drogas (salicilatos, fenotiazinas)pH elevado

HEMATOLOGIA

Equinocito

• Doenças:

UrémiaDeficiência em piruvato-quinaseCertas anemias com ↓ K+ globularAlgumas hepatites neo-nataisApós injecção de heparina

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Acantocito

• Eritrócito esferoidal com espículas irregularmente dispostas, variáveis em tamanho e forma com terminações normalmente arredondadas

• O número de espículas varia de 2 a 10

• Características físicas:Sobreponíveis ás do discocito

• Mecanismo de formação:Desconhecido

HEMATOLOGIAAcantocito

HEMATOLOGIAAcantocito

• Doenças:• 20 a 100% de acantocitos

Acantocitose congénita (ou a-βlipoproteinémia)

• 15 a 50% de acantocitosEstados de má-absorção dos lípidosCirrose alcoólicaAlguns casos raros de hepatite neo-natal

• 5% de acantocitos Esplenectomia

HEMATOLOGIA

PoiquilocitoseQueratocito

• Eritrócito que apresenta um ou vários entalhes

• Conteúdo em Hb normal ou próximo do normal

• Em esfregaço corado apresentam-se como discocitos com a zona de palidez central visível, tendo 2 espículas em forma de cornos mais ou menos afastados:

Se houver só 1, pode ser interpretado como dacriocito Se apresentar 4, pode ser tido como um acantocito

HEMATOLOGIA

Queratocito

• Mecanismo de formação:A lesão do GV consiste na união das faces internas da sua

membrana por uma superfície maior ou menor

Esta união que corresponde a uma zona de estreitamento da célula em que não há Hb dá, em contraste de fase, uma imagem de pseudo-vacúolo. São os pré-querato-citos

Os bordos destas zonas de união podem romper-se e os dois fragmentos resultantes afastam-se dando os aspectos em corno, que quando em exagero conferem ao GV um aspecto fusiforme

HEMATOLOGIA

Queratocito

HEMATOLOGIA

Queratocito

HEMATOLOGIA

Queratocito

• Doenças:

CID Anemia hemolítica micro-angiopáticaAlgumas glomerulonefritesRejeição de enxertos renaisHemangiomas cavernososPróteses cardíacas

CID = Coagulação intra-vascular disseminada

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Dacriocito• Discocito com prolongamento afilado, que termina

algumas vezes numa pequena dilatação

• Forma permanente

• Mecanismo de formação:Desconhecido

Nota: Não se devem confundir com discocitos que adiram por um ponto ao vidro da lâmina ou que estejam agluti-nados, por um ponto, a outras células.

HEMATOLOGIA

Dacriocito

HEMATOLOGIA

Dacriocito

Doenças:

Mielofibrose

Metaplasia mielóide

Tuberculose

Intoxicações (com corpos de Heinz)

Talassémias

Carcinomas com metástases na MO

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Drepanocito

• Discocito deformado pelo aparecimento de polímeros de hemoglobina anormal

• Podem pôr-se em evidência fazendo baixar a tensão de O2, por um dos seguintes métodos: – Colocando o garrote durante 10 minutos antes da colheita

de sangue– Adicionando um redutor, como o metabissulfito de sódio,

ao sangue colhido– Lotando o sangue entre lâmina e lamela, que se observa

24 hs depois

O fenómeno é reversível quando a tensão de O2 volta a aumentar

HEMATOLOGIA

Drepanocito

HEMATOLOGIA

Drepanocito

HEMATOLOGIA

Drepanocito

HEMATOLOGIA

Drepanocito

HEMATOLOGIACristal de Hb C

HEMATOLOGIA

Poiquilocitose Esquizocito

• É todo o fragmento de GV resultante do seu corte acidental

• Consoante o sítio e a quantidade de cortes assim se obtém ¾, ¼, etc. de GV

• Apresentam formas bizarras: triangulares, em vírgula, etc.

• Transformam-se rapidamente em esfero-esquizocitos que se hemolisam com facilidade

HEMATOLOGIA

Esquizocito

• Mecanismo de Formação:

É semelhante à dos queratocitos

Os eritrócitos são cortados ao passarem por filamentos de fibrina que se encontram nas paredes dos vasos e das próteses alteradas

Se do impacto não resultar o corte dos eritrócitos, podem surgir os pré-queratocitos

Do corte também pode resultar a hemólise imediata do eritrócito

HEMATOLOGIAEsquizocito

HEMATOLOGIA

Esquizocitose

HEMATOLOGIA

Esquizocito

• Características físicas:

São sempre microcitosFragilidade aumentada

• Doenças:

CIDAnemias hemolíticas Vasculites

HEMATOLOGIA

Inclusões eritrocitárias

• Corpos de Howell-Jolly• Anéis de Cabot• Ponteado basófilo• Corpos de Pappenheimer• Corpos de Heinz

HEMATOLOGIA

Corpos de Howell-Jolly

COR: Azul escura a púrpuraASPECTO: Redondo ou ovalTAMANHO: 1 µNº/CÉLULA: Habitualmente 1COMPOSIÇÃO:ADN

(Restos de cromatina nuclear)Surgem em: • Esplenectomizados • Atrofias do baço • Anemia megaloblásticas • Anemia hemolítica

HEMATOLOGIA

Anéis de Cabot

COR: Azul escura a púrpuraASPECTO: Anel, 8 Nº/CÉLULA: 1-2COMPOSIÇÃO: Restos azu-rófilos do fuso mitótico doseritroblastos

Podem estar associados a ponteado basófilo

Observam-se em: • Síndrome mielodisplásico• Anemia megaloblástica

HEMATOLOGIA

Ponteado basófilo

COR: Azul escura a púrpuraASPECTO: Grânulo fino

ou grosseiro Nº/CÉLULA: NumerososCOMPOSIÇÃO: RNA

(Possivelmente derivam dos ribossomas)

Traduzem uma perturbação na eritropoiese

HEMATOLOGIA

Ponteado basófilo

Encontram-se em:

• Talassémia• Infecções• Doenças hepáticas • Anemia megaloblástica• Intoxicações por chumbo e outros metais pesados• Doenças de hemoglobinas instáveis• Deficiência em pirimidina-5-nucleotidase

HEMATOLOGIA

Corpos de Pappenheimer

COR: Azul claraASPECTO: Grânulo fino

irregular ou em grumos Nº/CÉLULA: Geralmente um grumo

ou múltiplos com preferência pelaperiferia do eritrócito

COMPOSIÇÃO: Ferro

Podem confundir-se com reticulócitos, embora corem de azul mais forte

HEMATOLOGIA

Corpos de Pappenheimer

Coram de azul na reacção de Perls (Azul da Prússia)

Observam-se em:• Esplenectomizados• Anemias hemolíticas• Hemoglobinopatias• Anemias sideroblásticas• Anemias megaloblásticas

HEMATOLOGIA

Corpos de HeinzDescritos por Heinz, em 1890

COR: Azul escura a púrpuraTAMANHO: 1-3 µNº/CÉLULA: Singulares

ou múltiplos COMPOSIÇÃO:Hemoglobina

precipitada e ligada àmembrana celular

Visíveis em coloração supravitais

HEMATOLOGIA

Corpos de Heinz

Podem ser devidos a:

• Deficiência em G-6PD • Doenças de hemoglobinas instáveis • Hemoglobina H (α talassémia)• Intoxicações química

ou medicamentosa (agentes oxidativos, fenilhidrazina)

• Eritrócitos velhos

Controlo - GVs têm actividade proteásica capaz de osdegradar

- Baço

HEMATOLOGIA

Parasitismo