Post on 18-Apr-2015
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTASCENTRO DE DESENVOLVIMENTO E TECNOLOGIA
GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIADISCIPLINA DE ENGENHARIA TECIDUAL
PROFESSORA FERNANDA NEDEL
CLONAGEM
FERNANDO LOPEZ ALVEZVICTOR FONSECA
Pelotas, 2011
CLONAGEM
É um processo de reprodução assexuada que resulta na obtenção de cópias geneticamente
idênticas de um mesmo ser vivo. Microorganismo, vegetal ou animal.
CLONAGEM
Natural
Induzida
CLONAGEM
Natural
CLONAGEM
Induzida: Celular (Terapêutica) Reprodutiva (Organismos)
CLONAGEM INDUZIDA
CLONAGEM INDUZIDA
Terapêutica Técnica de SCNT; Isolamento das células no estágio de blastocisto; Cultivo das células tronco embrionárias;
Utilização: Desenvolvimento de estudos humanos; Tratamento de doenças.
CLONAGEM INDUZIDA
Terapêutica
Blastocisto Humano Colônia de células tronco embrionárias de humano, em feeder layer de fibroblasto embrionário de camundongo
CLONAGEM INDUZIDA
Reprodutiva SCNT; Eletrofusão; Formação do embrião; TE (Transferência de Embrião); Taxa de nascimento 2,5%;
Bipartição de embrião (estágio 6-8 células).
CLONAGEM REPRODUTIVA
CLONAGEM REPRODUTIVA
Dolly Primeiro mamífero clonado a partir de uma célula
adulta; Roslin Institute – Escócia; Importância na reprogramação; 237 oócitos – 29 embriões – 3 cordeiros – Dolly; DNA mitocondrial (incompatibilidade); Telômeros; Morte da Dolly devido à infecção respiratória.
CLONAGEM REPRODUTIVA
Lista de Animais Clonados
Girino 1952
Carpa 1963
Camundongo 1986
Ovelha 1996
Macaco Rhesus 2000
Gaur (Boi Selvagem) 2001
Vaca 2001 / 2005 (Brasil)
Gato 2001
Rato 2003
Mula 2003
Égua 2003
Cão 2005
Búfalo 2009
Camelo 2009
REPROGRAMAÇÃO
A célula doadora deve adotar os parametros de ciclo celular de um zigoto, como:
A. Replicação do DNA;
B. Condensação cromossômica;
C. Padrões embriônicos de replicação e transcrição de DNA.
FATORES QUE AFETAM REPROGRAMAÇÃO
Trichostatina A (TSA) é um composto orgânico que inibir seletivamente as deacetilases I e II de histonas mamíferas (HDAC).
A. Sincronia do ciclo celular da célula doadora com as celulas receptoras.
B. Origem tecidual da célula doadora, o número de passgens e as condições do meio de cultura.
C. Transferência de células com baixo nível de marcadores epigenéticos.
D. Modificando marcadores epigenéticos com drogas.
SERUM STARVATION
Diminuição de soro no meio de cultura – ou sua ausência – induzem quiescência das células e obriga elas a pararem no estágio de G0.
Alguns autores discutem a necessidade de indução para G0, pois células em estpagio G1 produziram animais.
TIPOS DE CÉLULAS DOADORAS
A. Células epiteliais mamárias;
B. Células do cumulus;
C. Fibroblasto da pele e outros tecidos;
D. Células de Sertoli.
Todavia não há um consenso de qual seria a célula doadora ideal para realizar-se a técnica.
EFEITO DE PASSAGENS
Células que sofreram passagens – até 15 – puderam ser utilizadas para produção de clones.
Células de fetos ou animais jovens são mais eficientes para transferência nuclear.
BENEFÍCIOS
A. Produção de transgênicos;
B. Proteção de espécies ameaçadas de extinção;
C. Produção de tecidos para xenotransplante.
OBRIGADO.