Salmonella spp. epidemiologia e diagnóstico laboratorial

Dalia dos Prazeres Rodrigues, Ph.DLaboratório de Referência Nacional de Cólera e

Enteroinfecções BacterianasLab. Enterobacterias

IOC/FIOCRUZdalia@ioc.fiocruz.br

Patógenos Emergentes e ReemergentesVeiculados pela Água e Alimentos

• Espécies patogênicas para o homem veiculadas pela água e alimentos

>1.400 diferentes microrganismos538 de espécies bacterianas

58 % zoonoses

Família Enterobacteriaceae• Características Gerais: morfologia• Habitat• Nomenclatura: fusão dos gêneros

Salmonella e Arizonae (hibridização de DNA)• Nomenclatura atual:

- Duas (?) espécies, seis subespécies diferenciação: provas bioquímicas;

- Sorovariedades: base nas associações de antígenos O e H (Kauffmann-White).

SalmonellaSalmonella sppspp. . caractercaracteríísticas geraissticas gerais

Resistência as condições físicas e químicas

Atividade hídrica: 0,94 a 0,99

Atmosfera:

Acidez: resistência é termodependente.

Tolerância ao sal: salmora

Irradiação gama

Antígeno somático (O) Antígeno flagelar(H)

Ag O• Composição: polissacarídeos• Grupos designados por letras ou números.

Ex. S.Enteritidis: grupo O9 ou OD1

Ag H• Composição: proteína – flagelina• Cultura pura de Salmonella expressa dois tipos

diferentes de flagelos: cada célula somente um tipo de flagelo (fase 1 ou fase 2)

• Caracterização: soro aglutinação rápida

Sorovares de Salmonella

• >2500 sorovares com base nas associações de antígenos O e H (Kauffmann-White).

• Aproximadamente 60% subespécie enterica I;

• Dez sorovares prevalentes representam >65% dos sorovares identificados no Brasil (IOC);

Transmissão de Salmonella spp.

ANIMAIS Homem

AlimentosÁgua

Microrganismos

Meio Ambiente

Cadeia Alimentar

Salmonelose: características

Incubação: 6 -72hCaracterísticas clínicas:Diarréia - Cólicas abdominais - Dor de cabeçaFebre (38 a 39°C) - Vômitos - Mialgia -Desidratação (crianças e idosos)Duração do quadro diarréico: 2 a 7 diasComplicações: artrite séptica, osteomielite,

meningite, bacteremia, pneumonia, endocardite, pielonefrite, morte.

Transmissão alimentar de patógenos

Aproximadamente 76 milhões/ano com 325.000 hospitalizações e 5.000 mortes;

Disseminação através de sistemas de criação intensiva

ROEDORES

AVES SILVESTRES

Disseminação através desistemas de criação intensiva

Fatores que dificultam o controle

Incidência anual da salmonelose• União Européia : 192.703 em 2004 média:

42.2/100.000 Variação: 6.6/100.000 em Portugal a 300.9/100.000 na República Tcheca (2005).

• Austrália: Em 1997: 38/100.000 2002: 40.3/100.000 habitantes

• Japão: 73/100.000 habitantes• USA: média de 14/100.000 (1997).

2004: 1.4 milhões de casos, 16.430 hospitalizações e 582 óbitos.

(40.000 casos confirmados por cultura).

LRNCEB Salmonella spp.

Sorovares prevalentes - LRN/IOC

Sorovares 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008*S. Agona 236 166 181 463 707 546 457 176

S. Anatum 133 96 91 168 259 351 270 120

S. Enteritidis 3.123 2.255 3.327 4.290 3.177 4.368 4078 1.178

S. Hadar 249 231 124 110 289 170 117 88

S. Heidelberg 502 547 474 355 214 305 371 145

S. Infantis 128 269 244 169 520 406 375 136

S. Mbandaka 238 392 513 546 555 700 738 136

S. Panama 392 905 682 510 821 376 305 155

S. Senftenberg 301 243 294 644 408 373 669 500

S. Typhimurium 480 379 439 996 1380 959 1327 663Outros sorovares 2.379 3.800 4.310 6.322 9.165 8.466 7073 6.476

Total 8.161 9.283 10.679 13.770 17.495 17.020 15780 9.773

Distribuição dos dez sorovares de Salmonella spp. prevalentes nas diferentes fontes (2007)

SOROVARES Humana Alimento Ambiente Animal Matéria Prima

CQInd. TOTAL

S. Enteritidis 602 1562 548 1181 174 11 4078S. Typhimurium 75 255 94 883 19 1 1327S. Minnesota - 168 264 334 35 15 801S. Mbandaka 3 54 210 278 178 - 738S. Senftenberg - 41 205 219 192 12 669S. Agona 1 59 158 197 37 5 457S. Tennesse - 54 146 115 52 23 390S. Infantis 5 95 87 145 42 1 375S. Heidelberg 4 24 13 329 1 - 371S. Schwarzengrund - 91 48 114 69 1 326

Distribuição por região de Salmonella spp. prevalentes (2007)

SOROVAR SUL SUDESTE NORTE NORDESTE CENTRO OESTE

S. Enteritidis 3434 158 3 85 398S. Typhimurium 1228 61 2 3 33S. Minnesota 785 - - - 16S. Mbandaka 684 16 - 5 33S. Senftenberg 645 9 - - 15S. Agona 395 8 2 2 50S. Tennesse 355 7 - - 28S. Infantis 311 17 2 10 35S. Heidelberg 365 2 - - 4S.Schwarzengrund 223 13 2 3 85

SOROVARES Humana Alimento Ambiente Animal Matéria Prima CQ

2006 2007 2006 2007 2006 2007 2006 2007 2006 2007 2006 2007

S. Enteritidis 308 602 2118 1562 1008 548 692 1181 143 174 99 11

S. Typhimurium 21 75 323 255 176 94 352 883 27 19 60 1

SOROVARES PREVALENTES: DISTRIBUIÇÃO POR FONTE DE ISOLAMENTO

Sorovares prevalentes de Salmonellaspp. por tipo de alimento (2007)

SOROVAR PRATO PRONTO

PRODUTO DE VENDA INSPEÇÃO TOTAL

S. Enteritidis 105 1424 33 1562

S. Typhimurium 10 235 10 255S. Minnesota - 164 4 168S. Mbandaka 1 51 2 54S. Senftenberg 1 39 1 41S. Agona 3 46 10 59S. Tennesse - 47 7 54S. Infantis 1 82 12 95S. Heidelberg - 21 3 24

S.Schwarzengrund 4 55 32 91

ANIMAIS SILVESTRES AVES BOVINOS SUÍNOS OUTROSSOROVAR2006 2007 2006 2007 2006 2007 2006 2007 2006 2007

S. Enteritidis - - 335 609 163 7 23 50 166 240S. Typhimurium 59 - 21 97 9 1 114 145 149 307S. Mbandaka - 1 58 57 65 - 14 5 31 77S. Agona - 2 21 36 56 - 79 10 23 88S. Infantis - 29 27 16 - 28 3 16 54S. Panama - 2 33 6 56 - 51 67 26 29

SALMONELLA spp.: SOROVARES INCIDENTES POR TIPO DE ANIMAL

Sorovares prevalentes entre cepas isoladas de bovinos em nosso meio no século XXI

SOROVARESANOS.Dublin S.Enteritidis S.Panama S.Derby S.Typhimurium

2001 - 3 - 1 12002 2 7 6 6 32003 8 3 1 8 102004 - 93 - 2 12005 1 5 - - -2006 - 163 56 29 92007 7 7 - - 1

Fagotipagem

Fagotipos prevalentes de S.Typhimurium: distribuição numérica

Fagotipos prevalentes de S.Enteritidis: distribuição numérica

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Cr

– 4,6

MDa

35,8 –

Cr

4,8 –

3,7 –

2,6 –

2,0 –1,8 –

Linha 1: E. coli V517 e Linha 10: E. coli 39R861Cr: DNA cromossomal

MDa

– 98 – 42 – 24

Caracterização de perfil plasmidial S.Enteritidis

Gene CMY Gene CTX

Slots 2, 3, 4, 5, 9 – S.Heidelberg Slots 2, 3, 4, 6: S.Heidelberg

Silva, WCP, Reis, EMF, Lazaro, NS, Costa, RG, Festivo, ML, Cantisani, ML, Araujo, MS & Rodrigues, DP, 2007

Slots 4, 5- S.EnteritidisGenes CMY – S.Enteritidis

593 bp

Caracterização de genes de resistência em Salmonella spp

S.TyphimuriumS.Panama

Eletroforese de Campo Pulsado - PFGE

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12S.Infantis

S.Enteritidis

Eletroforese de Campo Pulsado - PFGE

Custo da salmonelose• Calculo difícil: elevado número de casos não notificados;• USA : estimativa de 1caso informado /50 não informados• Na Suécia o número é reduzido • União Européia: média entre US e Suécia • Média de ocorrência de salmonelose nos USA: 2 milhões/ano• Custo: US$ 927 /caso clínico. • Holanda: US$ 1700/informado e US$ 343/não informado;• Em 1998 o custo de DTA nos EUA: US$2.329 milhões/ano• Sundström (2007): Suécia 17,460 casos (com base em

4.477casos registrados) custo de US$ 11.7 milhões.• Estimativa de que o gasto com salmonelose represente 60%

do custo total de um empregado.

Custo financeiro

• Estimativa anual WHO é de US$ 58 milhões/ano • Em 94% infecções diarréicas são reconhecidas como

as principais condições: ausência de tratamento de água, condições sanitárias precárias, higiene pessoal;

• 1.7 milhões de mortes/ano devido a infecções diarréicas;

• Incidência global de DTA em 2005: 1.8 milhões de mortes, com grande percentagem por alimentos e água para consumo. US$ 35 bilhões em custos clínicos e perda de produtividade;

• Principais alimentos envolvidos: ovos, aves e outros produtos cárneos, leite e produtos lácteos e chocolate.

Qual o Papel dos LACEN nesta Guerra ?

Diagnóstico laboratorial