Princípios de Boas Práticas de Laboratório da OCDE

APLICAÇÃO DAS PBL NOS ESTUDOS DE BIOEQUIVALÊNCIA-

A EXPERIÊNCIA DO LEF

Conteúdo

O LEF

Enquadramento

Requisitos

Aplicabilidade

1995

o LEF

Desenvolvimento Farmacêutico e Produção

Desenvolvimento Analítico e

Controlo de Qualidade

Biofarmácia Assuntos

Regulamentares e Farmacovigilância

Bioanálise Substância Matriz

biológica

Método de

análise

LOQ BD/BE

Diclofenac Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1992

Digoxina Soro LC-MS 0,3 ng/ml 1993

Terfenadina Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1993

Aciclovir Plasma HPLC/FLU 20 ng/ml 2 estudos em 1994

Omeprazol Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 1996, 1998

Acetato de

Megestrol

Plasma HPLC/UV 5,0 ng/ml 1996

Clonixina Plasma/Ur

ina

HPLC/UV 10/20

ng/ml

1997

Tramadol Plasma GC-MS 8,0 ng/ml 1998

Substância Matriz

biológica

Método de

análise

LOQ BD/BE

Nilutamida Plasma HPLC/UV 50 ng/ml 2000

Tenoxicam Plasma HPLC/UV 50 ng/ml 2000

Paracetamol Plasma HPLC/UV 100 ng/ml 2000, 2004

Ticlopidina Plasma HPLC/UV 10 ng/ml 2001

Loratadina/

desloratadina

Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2001

Captopril Plasma LC-MS/MS 40 ng/ml 2001, 2005

Cefadroxil Plasma HPLC/UV 0,25 µg/ml 2001

Alprazolam Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2001, 2004

Enlapril/enalaprilato Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2003; 2004

Flucloxacilina Plasma HPLC/UV 0,4 µg/ml 2003

Substância Matriz biológica Método de

análise

LOQ BD/BE

Nimesulida/

4-hidroxi

Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml 2003, 2004

Ranitidina Plasma HPLC/UV 40 ng/ml 2003

Fluconazol Plasma HPLC/UV 0,2 µg/ml 2004

Fluoxetina/

nor-fluoxetina

Plasma LC-MS/MS 1 ng/0,5 ng/ml 2004

Lansoprazol Plasma HPLC/UV 20 ng/ml 2004

Lorazepam Plasma LC-MS/MS 1 ng/ml 2 estudos

em 2004

Lovastatina/

OH-acid

Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml 2004

Nimodipina Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml 2004

Substância Matriz

biológica

Método de

análise

LOQ BD/BE

Ambroxol Plasma HPLC/UV 5,0 ng/ml 2004

Diazepam Plasma LC-MS/MS 5 ng/ml 2004

Ciclosporina Plasma HPLC/UV 20 ng/ml 2004

Valproato de sódio Plasma GC/MS 1,0 µg/ml 2007

Telmisartan Plasma LC-MS/MS 5 ng/ml 2011

Olmesartan/

Hidroclorotiazida

Plasma LC-MS/MS 10 ng/ml

10 ng/ml

2013

Free Ezetimibe/

Total Ezetimibe

Simvastatina

Plasma LC-MS/MS 0,5 ng/ml

1,0 ng/ml

0,25 ng/ml

2015

“The bioanalytical part of bioequivalence trials should be performed in accordance

with the principles of Good Laboratory Practice (GLP). However, as human

bioanalytical studies fall outside the scope of GLP, the sites conducting the studies

are not required to be monitored as part of a national GLP compliance programme”.

Estudos Bioequivalência

Estudo

… entende-se uma experiência ou um conjunto de experiências em que uma substância em

estudo é analisada, em condições laboratoriais ou em ambiente normal, a fim de se obterem

dados sobre as suas propriedades e ou segurança, com vista à sua apresentação às autoridades

regulamentares competentes.

Intervenientes

Administração da Instalação de ensaio

Administração do local de ensaio

Diretor de Estudo

Investigador principal

Programa de Garantia de Qualidade

1.1.Administração da Instalação Ensaio Identificação das pessoas com as responsabilidades definidas

Garantir pessoal qualificado, instalações, equipamento e materiais adequados

Garantir a existência e aprovar procedimentos internos

Garantir Programa de Garantia de Qualidade

Designar o Director de Estudo

Garantir a aprovação do Plano de Estudo

Nomeação do gestor de Arquivo

Garantir a elaboração e manutenção do plano mestre

Garantir a existência de linhas claras de comunicação

Garantir sistemas informatizados adequados e validados

Plano Mestre

… a compilação de toda a informação de apoio para avaliação da carga de trabalho

e para seguimento dos estudos numa instalação de ensaio.

Plano de Estudo … um documento que define os objetivos e a conceção do processo experimental para a

realização do estudo, incluindo quaisquer alterações introduzidas.

1.2 Diretor de Estudo

Responsável pela execução global do estudo e elaboração do relatório final

Aprovar o plano de estudo e quaisquer alterações

Disponibilizar o plano de estudo à Garantia de Qualidade

Disponibilizar todo o material necessário (plano de estudo, procedimentos internos) ao pessoal envolvido no estudo

Garantir o cumprimento do plano de estudo, avaliar e documentar o impacto dos desvios

Garantir o registo integral e documentação de todos os dados brutos

Garantir a validação dos sistemas informatizados

Aprovar o Relatório Final (validade dos dados e cumprimento BPL)

Garantir o arquivo (plano de estudo, relatório final, dados em bruto, e material de apoio)

Dados em bruto

…e todos os registos e documentação da instalação de ensaio, ou respetivas cópias

autenticadas, que constituem o resultado das atividades e observação originais de

um estudo. Os dados em bruto podem incluir também, por exemplo, fotografias,

cópias de microfilmes ou microfichas, dados em suporte eletrónico, observações

ditadas, dados registados a partir de instrumentos automatizados ou qualquer

outra forma de armazenamento de dados considerada capaz de armazenar

informação, de forma segura, durante o período de tempo fixado.

1.4. Pessoal do Estudo Deve ter conhecimentos necessários sobre BPL

Cumprimento das instruções constantes no plano de estudo e nos procedimentos internos

Quaisquer desvios devem ser documentados e comunicados ao DE

Responsável pelo registo imediato e preciso dos dados em bruto, bem como pela qualidade desses dados

Observar as medidas de precaução necessárias a fim de minimizar os riscos para a própria saúde e de garantir a integridade do estudo.

2.2. Pessoal de Garantia de Qualidade Procedimento de funcionamento do programa de GQ

Manter cópias dos planos de estudo aprovados

Acesso a uma cópia atualizada do plano mestre

Verificar o plano de estudo à luz das BPL (documentada)

Realizar e registar as inspeções (ao estudo, às instalações, aos procedimentos)

Verificar que todos os documentos necessários foram disponibilizados ao pessoal do estudo

Inspecionar os relatórios finais

Comunicar os dados de inspeção à administração e ao DE

Declaração a incluir no relatório final (tipos de inspeção, datas, fases do estudo inspecionadas, comunicação à AIE e ao DE e confirmar que o relatório reflete os dados brutos)

3. Instalações

• Áreas que garantam o isolamento

• Garantia de conservação e proteção

Sistemas de ensaio

• Evitar contaminações, misturas,

• condições adequadas de conservação;

• áreas segregadas para receção e armazenamento e para mistura com veículos

• Procedimentos para descontaminação e transporte (eliminação resíduos)

Manuseamento

• segurança, recuperação dos planos de estudo, dados brutos, relatórios,…

• protecção contra deterioração (fogo; inundações; humidade) Arquivo

4. Equipamento, materiais e reagentes Adequadamente localizados, conceção e capacidade adequados

Periodicamente inspecionados, limpos, mantidos e calibrados

Não devem interferir com os sistemas de ensaio

Produtos químicos, reagentes e soluções devem estar identificados (concentração, prazo de validade, instruções de armazenamento, data de preparação

5. Sistemas de Ensaio “Qualquer sistema biológico, químico ou físico, ou uma combinação

destes, utilizado num estudo”

p.ex: animais, plasma, tecidos

Condições adequadas de

armazenamento,

acomodação,

manuseamento, a fim de garantir a qualidade dos dados

Registos de origem, data e condições de chegada

Devidamente identificados

Evitar contaminação

6. Substâncias para estudo e de referência

Recepção, manuseamento, amostragem e armazenamento

◦ Registo de caracterização, data de receção, prazo de validade, quantidades recebidas e utilizadas

◦ Procedimentos

Caracterização

◦ Identidade, lote, pureza, teor, condições de estabilidade

7. Procedimentos

Substâncias para estudo e de referência

Equipamentos, materiais e reagentes

Conservação de registos, elaboração de relatórios, armazenamento e recuperação

Sistema de ensaio

Procedimentos da garantia de qualidade

Procedimentos LEF GERAIS

Gestão de Padrões

Gestão de Reagentes

Gestão de Equipamentos

Procedimentos de GQ

Controlo de Registos

Recursos Humanos

ESPECÍFICOS

Estudos no LEF segundo os Princípios BPL/OCDE

Validação Métodos Bioanalíticos

Estudos BPL- manuseamento de Amostras

Análise de Amostras Biológicas

Repetição de Análise de Amostras

Limpeza e desinfecção do laboratório e Equipamentos de Bioensaios

Atuação da Unidade de Garantia de Qualidade

Análise Farmacocinética e Tratamento estatístico

Avaliação Cromatogramas

8. Execução do Estudo Plano de Estudo

“Documento que define os objetivos e a conceção do processo experimental para a realização do

estudo, incluindo quaisquer alterações introduzidas”

A cada estudo deve ser atribuída uma única identificação

Aprovado pelo DE

Avaliação da conformidade BPL pela GQ

Aprovação pela Administração da instalação de ensaio

Aprovado pelo Patrocinador

Todos os desvios devem estar descritos, explicados e datados pelo DE

8. Execução do Estudo Conteúdo Plano de Estudo

Identificação do estudo, da substância para estudo e da substância de referência

Informações relativas ao patrocinador e à instalação de ensaio

Datas (data de aprovação do plano de estudo; datas propostas para início e conclusão do processo experimental)

Métodos de Ensaio

Registos (lista de registos a conservar)

9. Relatório Estudo

Identificação do estudo, da substância para estudo e da substância de referência

Informações relativas ao patrocinador e à instalação de ensaio

Datas e início e conclusão do processo experimental

Resultados

Descrição dos materiais e métodos de ensaio

Armazenamento

10. Armazenamento e conservação dos registos e materiais

• Plano de Estudo

• Dados em Bruto

• Relatório Final

• Registos de Inspeções

• Plano Mestre

• Validação dos sistemas informatizados

• Registos de Monitorização ambiental

• Amostras dos espécimes

• Substância Referência

• Registo de Qualificação Pessoal

• Registos de manutenção e calibração dos aparelhos

• Procedimentos

Ficheiro BPL

15 anos

GLP e Bioanálise VALIDAÇÃO DO MÉTODO

Linearidade

Rigor e Precisão

Seletividade

Estabilidade em várias condições

ANÁLISE AMOSTRAS

Linearidade

Rigor e Precisão

Incurred Samples

Integração cromatográfica

Definição lote de análise

Reanálise de amostras

Desvios e impacto

Notas Conclusivas

O cumprimentos das BPL em estudos Bioequivalência asseguram a

dos dados gerados.

Obrigada!

Margarida.Barreto@anf.pt

Tlm: 937742929

lef@anf.pt