Post on 02-Jun-2020
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Genética Bacteriana e
Clonagem
Universidade de Santo Amaro
Faculdade de Biomedicina
Microbiologia Básica e Clínica I
É responsável pelo armazenamento e
transmissão da informação biológica
DNA Ácido Desoxirribonucleico
GC
AT
T
T
A
A
GC
5`
3`5`
3`
DNA
Estrutura
Primária
CROMOSSOMO
◼ Dupla fita circular
◼ Tamanho varia de acordo com o tipo de bactéria
➢ Escherichia coli – 4,6 milhões de bases (850 x maior que a
célula)
◼ Difuso na região nucleóide
◼ Genes para o metabolismo e ciclo vital
◼ Constituído por partes codificantes
➢ Ausência de Introns
PLASMÍDEO
◼ Segmento de DNA circular, pequeno, contendo genes
acessórios para o metabolismo.
◼ Pode conter genes para produção de fímbrias, toxinas e
enzimas de resistência a antimicrobianos.
◼ Pode ser transferido de bactéria para bactéria pelo processo
de conjugação.
O cromossomo dos procariontes é circular
Eucariotos x Procariotos
Meio com glicose
(lacL) gene repressor
(lacP) gene promotor
(lacO) gene operador
(lacZ) β-galactosidase
•(lacY)lactose-permease
•(lacA) tiogalactosídeo-transacetilase
Sem glicose e com lactose
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A Bactéria como ferramenta
Clonagem Molecular
Estrutura básica de um plasmídeo-
vetor
RT
AAAAAAAA
AACT GGCA TCGT
AACT GGCA TCGT
Clonagem Molecular
RNA
ds cDNA
ds cDNA
cDNA
Tecido
Am
pr
ORI
Am
pr
ORI
cDNA
PLASMÍDIODNA
RECOMBINANTE
VETORES
Seleção das bactérias transformadas
Bactérias que não receberam o DNA (inserto)
crescem formando colônias azuis (presença do
gene LacZ) enquanto aquelas que foram
transformadas crescem incolores.
Produção de medicamentos
◼ Produção de insulina humana
recombinante
◼ Produção de GH
Produção de medicamentos
◼ Produção de Filgrastim – G-CSF
Desenvolvimento de vacinas
◼ Vacina recombinante contendo
antígeno HBs para Hepatite B
Pesquisa e desenvolvimento
◼ Produção de etanol
◼ Produção de peptídeos utilizados
para pesquisas.
Produtividade aumentada de etanol a partir de
hidrolisados de lignocelulose por Escherichia colicom utilização regulada de glicose
Síntese de peptídeos